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PCR實操避坑分享
PCR實操避坑分享 發布時間:2025-09-28
前段時間和大家分享了PCR反應的過程控制,今天來聊聊PCR的操作手法。實操可以說是整個PCR實驗流程中最容易被忽略卻又至關重要的一環。下面小編就來分享一下自己當初的一些經驗心得,僅代表個人看法。先說體系配置(各組分分開,非預混液)。配置前先計算好所需要的各組分體積,統一配置好后再...
  • 2022

    4-21
    帶你全面了解移液器
    移液器是實驗室用于取樣和加液常用的精密量器,是量出式量器,分定量和可調兩種類型。移液器是指一支移液器的容量是固定的,而可調移液器的容量在其標稱容量范圍內連續可調。移液器使用時的注意事項(1)吸取液體時要緩慢均勻,避免液體濺到移液桿上。(2)...
  • 2022

    4-19
    核酸提取儀使用注意事項
    核酸提取儀主要由磁套、磁棒、進給板和步進電機四個部分組成;磁套位于磁棒的下方且對齊形成一對互相配合使用,進給板位于磁套的下方;磁套、磁棒和進給板分別連接一個步進電機;磁套和磁棒的步進電機控制磁套和磁棒的上下相對運動,與進給板相接的步進電機控...
  • 2022

    4-12
    實時熒光定量PCR儀使用的基本步驟
    實時熒光定量PCR儀技術的原理:體外核酸擴增,加熱使雙鏈DNA解開螺旋,在退火溫度條件下引物同模板DNA雜交,在TaqDNA聚合酶,dNTPs(脫氧核糖核苷三磷酸),Mg2+和合適pH緩沖液存在條件下延伸引物,重復“變性→退火一引物延伸”過...
  • 2022

    4-6
    程序降溫盒使用經驗分析
    程序降溫盒的使用方法直都搞不明白,覺得是不是應該把程序降溫凍存盒先從-80度移到室溫放一段時間(細胞剛開始還沒凍的時候就是室溫),然后把細胞放進去,再一起移到-80度,這樣才能實現程序降溫呢?時間使用長了,感覺里面的液體是不是異丙醇啊,使用...
  • 2022

    3-23
    三槽梯度PCR儀你真的了解嗎?
    一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增就可以篩選出表達量高的適合退火溫度進行有效的擴增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,這...
  • 2022

    3-16
    程序降溫盒使用小技巧
    程序降溫盒在沒有酒精或任何液體的情況下,能確保在低溫冰箱中樣品的降溫速率為-1℃/分鐘。它們可以運用于各種細胞類型,包括干細胞,原代細胞和細胞系。這對于大多數需要培養的細胞系來說是非常理想的。已經通過干細胞,原代細胞和細胞系的使用,證明了提...
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